在ELISA（酶聯免疫吸附測定）檢測中，間接法是一種常用的檢測方式。其基本原理是利用抗原-抗體之間的特異性結合反應來檢測樣本中的目標物質。具體步驟如下：
1. 首先將已知的抗原固定在固相載體上（如微孔板），這個過程稱為包被。
2. 然后加入待測血清或其它樣本，如果其中含有能與上述抗原特異性結合的目標抗體，則會形成抗原-抗體復合物。
3. 接著洗滌去除未結合的成分，以減少非特異性的背景干擾。
4. 再次加入酶標記的二抗（即針對待測物種IgG Fc段的抗體），該二抗能夠與第一步形成的抗原-樣本抗體復合物中的抗體部分相結合。
5. 經過洗滌去除未結合的酶標二抗后，加入底物溶液。若存在目標抗體，則酶標記的二抗會催化底物發(fā)生顏色變化，通過檢測吸光度值來判斷和定量目標抗體的存在。
間接法主要用于測定血清中特定類型的抗體（如IgG、IgM等），具有較高的靈敏度和特異性，在臨床診斷、流行病學調查等領域有著廣泛的應用。