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血細胞分類流式細胞術

流式細胞術(flowcytometry,F(xiàn)CM)是一種綜合應用光學、機械學、流體力學、電子計算機、細胞生物學、分子免疫學等學科技術,使被測溶液流經(jīng)測量區(qū)域,并逐一檢測其中每一個細胞的物理和化學特性,從而對高速流動的細胞或亞細胞進行快速定量測定和分析的方法。

首先,待測細胞經(jīng)處理或染色后被壓入流動室,與此同時,不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管人口方向與待測樣品流成一定角度,這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動,組成一個圓形的流束,待測細胞在包繞下單行排列,依次通過檢測區(qū)域。在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩個光源信號分別反映了細胞體積的大小和內(nèi)部的信息。經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號,再通過模,數(shù)轉(zhuǎn)換器。將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計算機識別的數(shù)字信號,經(jīng)計算機處理,可將分析結(jié)果顯示在屏幕上。

為了保證細胞單個排列地逐一通過檢測區(qū)域,鞘流技術在流式細胞術中被廣泛應用。根據(jù)層流理論,由于兩種液體的流速和壓力不同。在一定條件下樣品溶液與包裹它的鞘液在流動中可以保持相互分離并且同軸。同時鞘液流可以加速樣品溶液中顆粒的流動并迫使他們的流動軌跡保持在液流的中軸線上,使細胞單排列地逐一通過檢測區(qū)域,這便是所謂的液流聚焦原理。

喬巴呦 發(fā)表于 2013-06-06 16:47:14 內(nèi)容:


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