測定酶活力時都有哪些注意事項?
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(1)酶促反應(yīng)過程中,只有最初一段時間內(nèi)反應(yīng)速度與酶濃度成正比,所以要用初速度表示酶促反應(yīng)速度。
(2)要規(guī)定時間、溫度、pH等反應(yīng)條件,并在酶測定過程中保持這些反應(yīng)條件的恒定。
(3)配制的底物濃度應(yīng)準(zhǔn)確且足夠大,底物液中應(yīng)加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中,以防止底物被分解。
(4)標(biāo)本要新鮮,應(yīng)保存于冰箱中。用血漿時,應(yīng)考慮到抗凝劑對酶反應(yīng)的影響。應(yīng)注意防止溶血和白細胞的破裂。
(5)在測定過程中,所用儀器應(yīng)絕對清潔,不應(yīng)含有酶的抑制物,如酸、堿及蛋白沉淀劑等。
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