檢驗職稱考點:尿液蛋白質(zhì)檢查檢測方法及評價
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1. 尿蛋白定性試驗為蛋白尿的過篩試驗。
(1)試帶法:利用pH指示劑的蛋白誤差原理。本法對清蛋白較敏感,對球蛋白的敏感性僅為清蛋白的1/100~1/50,且可漏檢本周蛋白。尿液pH值增高也可產(chǎn)生假陽性。本法快速、簡便、易于標(biāo)準(zhǔn)化,適于健康普查或臨床篩檢。
(2)加熱乙酸法:為傳統(tǒng)的經(jīng)典方法。加熱煮沸使蛋白變性、凝固,然后加酸使尿液pH接近尿蛋白質(zhì)等電點(pH4.7),在含有適量無機鹽狀況下,蛋白質(zhì)更易于變性下沉,同時可消除某些磷酸鹽(如無定形磷酸鹽、銨鎂磷酸鹽等)在堿性條件下易析出結(jié)晶、造成混濁的干擾。
(3)磺基水楊酸法:又稱磺柳酸法。操作簡便、反應(yīng)靈敏、結(jié)果顯示快,與清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能發(fā)生反應(yīng);敏感度達0.05g/L,因而有一定的假陽性。被NCCLS作為干化學(xué)法檢查尿蛋白的參考方法,并推薦為檢查尿蛋白的確證試驗。
2. 尿蛋白定量試驗:沉淀法、比色法、比濁法、染料結(jié)合法、免疫測定法和尿蛋白電泳法等。
比色法:常用雙縮脲比色法,為蛋白質(zhì)定量測定經(jīng)典方法。本法顯色穩(wěn)定,對清蛋白、球蛋白的反應(yīng)都有同樣的靈敏度,但靈敏度低。
染料結(jié)合法:方法有考馬斯亮藍法、麗春紅S法等??捡R斯亮藍染料易沉著在比色杯上,應(yīng)注意洗脫。
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