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酶活性測(cè)定的方式

2019-09-29 11:02 來源:
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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)與大家一起跟著大綱來復(fù)習(xí)!酶活性測(cè)定的方式是檢驗(yàn)技士考試需要掌握的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理匯總?cè)缦拢M梢詭椭蠹覐?fù)習(xí)掌握。

酶促反應(yīng)速度的測(cè)定可采用兩種方式:

一、測(cè)定完成一定量反應(yīng)所需的時(shí)間;

二、測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)的酶促反應(yīng)量。前者稱為終點(diǎn)法,后者稱為動(dòng)力學(xué)法。

終點(diǎn)法

該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據(jù)反應(yīng)進(jìn)行到某一程度(即達(dá)到某一指標(biāo))所需要的時(shí)間長(zhǎng)短來估計(jì)酶的活力。

其一個(gè)發(fā)展是采用檢測(cè)器對(duì)反應(yīng)進(jìn)行連續(xù)跟蹤,并在反應(yīng)達(dá)到某一程度時(shí),精確地自動(dòng)記錄所需要的時(shí)間,這就是酶分析自動(dòng)化中的固定濃度法;另一個(gè)發(fā)展是作成簡(jiǎn)便的酶檢測(cè)紙片。

動(dòng)力學(xué)法

該方式測(cè)定原理是:在一定條件下,酶促反應(yīng)速度和酶濃度成正比,因此測(cè)得反應(yīng)速度就需要求得酶濃度。待測(cè)的酶濃度是影響反應(yīng)速度的唯 一 因素,其他因素都應(yīng)處于最適于酶發(fā)揮催化作用的水平,為此應(yīng)選擇適宜的底物濃度、緩沖體系、溫度,并向反應(yīng)系統(tǒng)中添加必要的輔助因子。

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