掌握！時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定的基本原理

2023-08-01 15:38 來(lái)源：醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)

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臨床免疫學(xué)與檢驗(yàn)

基本原理

是一種非放射性核素免疫分析技術(shù)，用鑭系元素（Eu3+最常用）標(biāo)記抗原或抗體，用時(shí)間分辨技術(shù)測(cè)量熒光，同時(shí)檢測(cè)波長(zhǎng)和時(shí)間兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行信號(hào)分辨，可有效地排除非特異熒光的干擾，提高了分析靈敏度。

時(shí)間分辨	①非特異性熒光：為各種組織、蛋白或其他化合物，在激發(fā)光的照射下發(fā)出一定波長(zhǎng)的自發(fā)熒光，熒光壽命較短 ②鑭系螯合物的熒光壽命較長(zhǎng) ③待非特異性熒光完全衰變后再測(cè)定鑭系螯合物的特異性熒光信號(hào)，可有效地降低本底熒光的干擾，此稱(chēng)為時(shí)間分辨
Stokes位移	為激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的波長(zhǎng)差若Stokes位移小，激發(fā)光譜和發(fā)射光譜常有重疊，相互干擾，影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性鑭系元素的Stokes位移較大，很容易消除激發(fā)光的散射干擾
信號(hào)增強(qiáng)	Eu³⁺標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物在酸性增強(qiáng)液中可使熒光增強(qiáng)

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