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血細胞比容測定原理

2016-06-29 09:59 來源:
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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了“血細胞比容測定”相關(guān)知識供大家參考學(xué)習,希望對大家有所幫助!

(一)檢測原理

血細胞比容(Hct、Ht、HCT或PCV)是指在一定條件下,經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細胞在全血樣本中所占比值。

1、離心法:包括溫氏法(Wintrobe法)、微量法:是將抗凝血置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或毛細玻管中,以一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后,計算紅細胞層占全血的體積比。

2、血液分析儀法:原理是當細胞通過計數(shù)小孔時,形成相應(yīng)大小的脈沖,脈沖的多少即為細胞數(shù)量,脈沖高度為細胞體積,通過紅細胞平均體積(MCV)和紅細胞計數(shù)(RBC)即求得血細胞比容,Hct=MCV×RBC. 醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理

(二)方法學(xué)評價

1、手工法:有折射計法、粘度法、比密測定法、離心法和放射性核素法。溫氏法:采用中速離心,不能完全排除紅細胞間殘留血漿,測定結(jié)果偏高,已屬淘汰。微量法:采用高速離心,細胞間殘留血漿比溫氏法少(約2%),且樣本用量小、操作簡便、殘留血漿1%-3%.

2、血液分析儀法:儀器法CV為1%,手工法CV為2%,儀器法應(yīng)注意紅細胞增多癥或血漿滲透壓異常時會出現(xiàn)誤差。

(三)質(zhì)量控制

1、手工法:抗凝劑量不準確、混勻不充分、離心速度不夠會產(chǎn)生誤差。紅細胞形態(tài)異常(如小紅細胞、大紅細胞、橢圓形紅細胞、鐮形紅細胞)或紅細胞增多癥可使血漿殘留量增加6%.當紅細胞增多時,Hct明顯增高,血漿殘留也會增加。

2、血液分析儀法:要注意Hct是否與RBC、MCV相關(guān)。

(四)參考值

Wintrobe法:男性0.40~0.54;女性0.37~0.47.

微量法:男性0.47±0.04;女性0.42±0.05.

(五)臨床意義

1、增高:見于各種原因所致血液濃縮,如大量嘔吐、大手術(shù)后、腹瀉、失血、大面積燒傷、真性紅細胞增多癥(可達0.80L/L)、繼發(fā)性紅細胞增多癥等。

2、減低:見于各種貧血,但不同類型的貧血,Hct減少程度與RBC計數(shù)值不完全一致。

3、輸液評估:用于評估血漿容量有無增減或濃縮稀釋程度,有助于控制補液量和了解體液平衡情況,是臨床輸血、輸液治療療效觀察的指標。

4、計算平均值:作為紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白濃度計算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。也是影響全血粘度的決定因素之一。

(六)操作方法和注意事項

1、溫氏法:取EDTA-K2或肝素鈉抗凝靜脈血2ml,加入溫氏管中,用水平離心機以2264g(即有效半徑22.5cm,3000r/min),離心30分鐘,離心后血液分為5層,自上而下分別為血漿層、血小板層、白細胞層和有核紅細胞層、還原紅細胞層(紫黑紅色)、帶氧紅細胞層(鮮紅色)。讀取還原紅細胞層柱高的毫米數(shù),乘以0.01,即為每升血液中紅細胞體積的升數(shù)。

2、微量法:取抗凝全血或末梢血,充入一次性毛細玻管(管長75mm,內(nèi)徑約0.8~1.0mm,壁厚0.20~0.25mm,每支含肝素2U)的2/3(50mm)處,封口后,用水平式毛細管Hct離心機以12000r/min(相對離心力RCF≥10000g),離心5min,用專用讀數(shù)板或刻度尺,讀取還原紅細胞層和全層長度,計算Hct值。

3、注意事項:橡皮泥封管口底面應(yīng)平整,以深入毛細血管內(nèi)2mm左右為宜。應(yīng)做雙份試驗,結(jié)果之差應(yīng)<0.01.

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