HLA分型
HLA分型并不只是一種應(yīng)用性的臨床檢測指標(biāo)，免疫遺傳學(xué)研究的發(fā)展，很大程度上依賴于以分型為主要手段的HLA多態(tài)性分析。
一、血清學(xué)分型法
血清學(xué)分型法，是應(yīng)用一系列已知抗HLA的特異性標(biāo)準(zhǔn)分型血清與待測淋巴細(xì)胞混合，借助補(bǔ)體的生物學(xué)作用介導(dǎo)細(xì)胞裂解的細(xì)胞毒試驗(yàn)。因分型血清和淋巴細(xì)胞用量少，稱為補(bǔ)體依賴的微量細(xì)胞毒（CDC）試驗(yàn)。能夠應(yīng)用該法檢測的抗原稱為SD抗原，包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DR、HLA-DQ。
二、細(xì)胞學(xué)分型法
細(xì)胞分型法，是以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（**C）或稱混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（**R）為基本技術(shù)的HLA分型法。能用本法測定的抗原稱為LD抗原，包括HLA-D、HLA-DP。**C又有單向和雙向之分。
（一）單向**C
根據(jù)選用的刺激細(xì)胞類型，可將單向**C分為陽性和陰性分型法。
1.陰性分型法
又稱純合子細(xì)胞分型法。
2.陽性分型法
陽性分型法又稱預(yù)致敏淋巴細(xì)胞分型法（PLT）。
HLA-D抗原可用陰性和陽性分型法檢測，HLA-DP抗原只用陽性分型法檢測。
（二）雙向**C
遺傳型不同的兩個個體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時，由于兩者HLA不同，能相互刺激導(dǎo)致對方淋巴細(xì)胞增殖，故稱雙向**C。
本法不能判斷型別，只能說明供、受體HLA抗原配合程度，雙向**C強(qiáng)度與兩個體間HLA抗原差異成正比，器官或細(xì)胞移植時，應(yīng)選擇**C最弱者為供體。
三、分子生物學(xué)分型法
（一）RFLP與PCR-RFLP分型法
限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析，是最早建立的研究HLA多態(tài)性的DNA分型技術(shù)。這種HLA分型法稱為DNA-RFLP。若對DN**段進(jìn)行體外擴(kuò)增，然后再用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切分析，可使限制性長度分析的敏感度大大增加，此類引入DNA體外擴(kuò)增技術(shù)的限制性片段長度多態(tài)性分析則稱為PCR-RFLP分型法。
PCR-RFLP分型法所應(yīng)用的PCR引物為HLA組特異性的，此法特別適應(yīng)于小量標(biāo)本的研究和異基因骨髓移植供者的選擇。
（二）PCR-SSO分型法
序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-SSO）是PCR與雜交相結(jié)合的技術(shù)，從而對擴(kuò)增產(chǎn)物作出HLA型別判斷。
PCR-SSO是Ⅱ類HLA分型應(yīng)用最廣泛的方法，能夠鑒定所有已知序列的HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP等位基因。
基因芯片是近年發(fā)展起來的一項(xiàng)新技術(shù)，將其與PCR-SSO結(jié)合應(yīng)用于HLA分型，可使分型趨于規(guī)?；妥詣踊绕湓贖LA多態(tài)性和疾病遺傳背景分析等方面更具優(yōu)勢。
（三）PCR／SSP分型法
該方法應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套HLA等位基因的序列特異性引物（SSP），對待測DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而獲得HLA型別特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物。
（四）PCR-SSCP分型法
單鏈構(gòu)象特異性-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-SSCP），是以待測基因PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)，對擴(kuò)增的DNA單鏈（ssDNA）的HLA分型方法。
（五）SBT分型法
基于序列的HLA分型法（SBT），可通過對擴(kuò)增后的HLA基因片段進(jìn)行的核酸序列測定判斷HLA型別。
除上述方法外，業(yè)已建立的HLA基因分型技術(shù)還有PCR異源二聚體電泳多態(tài)即PCR指紋圖分析、虛擬DNA分析、嵌合體測定、差異顯示PCR、擴(kuò)增非變異突變系統(tǒng)或擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)（ARMS）等。
