免疫診斷試劑使用注意事項(xiàng)

一．試劑準(zhǔn)備

1）試驗(yàn)前將所需試劑盒組分在室溫或37℃平衡30分鐘；

2）試劑盒及其組分的保存按試劑盒操作說明書進(jìn)行；

3）保存試劑盒的冰箱應(yīng)經(jīng)常檢查儲(chǔ)存溫度并作好記錄；

4）保存試劑盒的冰箱應(yīng)避免頻繁開關(guān)。

二．標(biāo)本準(zhǔn)備

1）抽血時(shí)，應(yīng)盡量避免溶血；

2）非抗凝血自然凝固1-2小時(shí)后，3000rpm離心15分鐘以制備血清標(biāo)本；

3）用含有抗凝劑的采血管采血后，應(yīng)立即顛倒混合5-10次并放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘以制備血漿標(biāo)本；

4）標(biāo)本若在五天內(nèi)檢測(cè)，應(yīng)在2-8℃冰箱中保存，標(biāo)本若需長(zhǎng)期貯存，應(yīng)于-20℃中密封保存，長(zhǎng)期貯存的標(biāo)本應(yīng)為血清或血漿；

5）用于ELISA一步法檢測(cè)的標(biāo)本，不能使用NAN3防腐；

6）標(biāo)本如需稀釋，請(qǐng)用人血清或小牛血清稀釋（說明書有指明的除外）。

三．加樣

1）加樣應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書中所規(guī)定的量和順序進(jìn)行；

2）加樣時(shí)應(yīng)將標(biāo)本加在微孔反應(yīng)板底部；

3）如不慎將樣本或試劑濺出孔外時(shí)，應(yīng)用吸水紙輕拭吸干，并做好記錄；

4）手工操作時(shí)，微孔反應(yīng)板加樣后應(yīng)及時(shí)溫育；

5）標(biāo)本加樣過多時(shí)應(yīng)分批操作，以免加樣后溫育前等待時(shí)間過長(zhǎng)。

四．溫育

1）測(cè)量溫度應(yīng)使用校準(zhǔn)過的水銀溫度計(jì)；

2）溫育容器的溫度應(yīng)恒定為37℃；

3）如果使用恒溫箱溫育時(shí)，除保證恒溫箱內(nèi)溫度為37℃外，還應(yīng)注意盡量少開啟恒溫箱門；溫育時(shí)微孔板不要疊加；

4）微孔板不要置室溫溫育；

5）嚴(yán)格按試劑盒操作說明書控制溫育時(shí)間，不能人為延長(zhǎng)或縮短溫育時(shí)間；

6）微孔反應(yīng)板溫育時(shí)要加貼封片，這樣可以防止孔內(nèi)液體成分蒸發(fā)或水珠等雜質(zhì)滴入孔內(nèi)影響檢測(cè)結(jié)果；封片不能重復(fù)使用。

五．洗板

1）配置洗滌液需要新鮮、干凈，且無細(xì)菌污染的蒸餾水或去離子水，洗滌液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配；

2）盛放洗滌液的塑料容器應(yīng)經(jīng)常使用清洗劑徹底清洗，清洗干凈后的容器方可使用；

3）洗板時(shí)應(yīng)保證洗滌液注滿微孔反應(yīng)板的每個(gè)孔，洗完板后將微孔反應(yīng)板在吸水板上輕輕拍干；

4）為保證洗板前洗板針的暢通，應(yīng)經(jīng)常用細(xì)針清除掉洗板針內(nèi)積存的纖維蛋白等雜質(zhì)；

5）使用洗板機(jī)洗板時(shí)，合理安排洗板時(shí)間和洗板間隔，避免因反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)；

6）微孔反應(yīng)板洗板次數(shù)要保持一致，不能過多或過少；

7）如果微孔反應(yīng)板需要拼接于板架上，必須確保板條放平，以免影響洗板機(jī)操作而造成洗板不徹底。

六．顯色

1）OPD顯色劑要在使用前配制，不能使用過期顯色劑；請(qǐng)勿使用肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑；

2）添加顯色劑時(shí)，注意不能濺出孔外；

3）顯色劑應(yīng)避免接觸金屬器械。

七．終止

加終止液應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡，以免比色時(shí)結(jié)果不準(zhǔn)確。

八．結(jié)果判讀

1）酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)，應(yīng)保證微孔反應(yīng)板底部清潔；

2）按說明書的規(guī)定進(jìn)行讀數(shù)和結(jié)果判讀。

九。全過程

ELISA實(shí)驗(yàn)的整個(gè)操作過程中保證微孔反應(yīng)板不接觸次氯酸。