Km值是酶的特征常數(shù)之一，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，而與酶濃度無關(guān)。不同的酶，Km值不同。同一個酶有幾種底物時，則對每一種底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。

綜上所述，根據(jù)酶的特性及定量原理，測定酶活力時，必須注意以下幾點：

（1）酶促反應(yīng)過程中，只有最初一段時間內(nèi)反應(yīng)速度與酶濃度成正比，隨著反應(yīng)時間的延長，反應(yīng)速度即逐漸降低。

（2）要規(guī)定一定的反應(yīng)條件，如時間、溫度、pH等，并在酶測定過程中保持這些反應(yīng)條件的恒定，如溫度不得超過規(guī)定溫度的士1℃，pH應(yīng)恒定。

（3）配制的底物濃度應(yīng)準確且足夠大，底物液中應(yīng)加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中，以防止底物被分解。

（4）標本 Km值是酶的特征常數(shù)之一，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，而與酶濃度無關(guān)。不同的酶，Km值不同。同一個酶有幾種底物時，則對每一種底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。

綜上所述，根據(jù)酶的特性及定量原理，測定酶活力時，必須注意以下幾點：

（1）酶促反應(yīng)過程中，只有最初一段時間內(nèi)反應(yīng)速度與酶濃度成正比，隨著反應(yīng)時間的延長，反應(yīng)速度即逐漸降低。

（2）要規(guī)定一定的反應(yīng)條件，如時間、溫度、pH等，并在酶測定過程中保持這些反應(yīng)條件的恒定，如溫度不得超過規(guī)定溫度的士1℃，pH應(yīng)恒定。

（3）配制的底物濃度應(yīng)準確且足夠大，底物液中應(yīng)加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中，以防止底物被分解。

（4）標本要新鮮，由于絕大多數(shù)酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應(yīng)保存于冰箱中。用血漿時，應(yīng)考慮到抗凝劑對酶反應(yīng)的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在采血、分離血清時，應(yīng)注意防止溶血和白細胞的破裂。

（5）在測定過程中，所用儀器應(yīng)絕對清潔，不應(yīng)含有酶的抑制物，如酸、堿、蛋白沉淀劑等醫(yī)學教育網(wǎng)搜集|整理。

要新鮮，由于絕大多數(shù)酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應(yīng)保存于冰箱中。用血漿時，應(yīng)考慮到抗凝劑對酶反應(yīng)的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在采血、分離血清時，應(yīng)注意防止溶血和白細胞的破裂。

（5）在測定過程中，所用儀器應(yīng)絕對清潔，不應(yīng)含有酶的抑制物，如酸、堿、蛋白沉淀劑等。