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動物解剖學(xué)組織學(xué)及胚胎學(xué)(細(xì)胞學(xué))

  [ 執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試教學(xué)大綱 ]

  一、細(xì)胞的形態(tài)與大小

   (一)細(xì)胞的形態(tài) (二)細(xì)胞的大小

  二、細(xì)胞的構(gòu)造與功能

  (一)細(xì)胞膜 (二)細(xì)胞質(zhì) (三)細(xì)胞核

  三、細(xì)胞周期

  (一)G1期 (二)S期 (三)G2期 (四)M期

  四、細(xì)胞分裂

  (一)無絲分裂 (二)有絲分裂

  五、細(xì)胞分化

  六、細(xì)胞衰老與死亡

  [ 文本教案 ]

  目的要求

  1. 要求學(xué)生掌握細(xì)胞的形態(tài)和大小

  2. 掌握細(xì)胞膜的“液態(tài)鑲嵌模型”的結(jié)構(gòu)及功能

  3. 掌握細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能

  重 點(diǎn)

  液態(tài)鑲嵌模型,各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能

  難 點(diǎn)

  1. 細(xì)胞膜的分子結(jié)構(gòu),即液態(tài)鑲嵌模型或脂質(zhì)球蛋白鑲嵌模型

  2. 細(xì)胞膜的功能中的擴(kuò)散作用、主動運(yùn)輸、胞吞作用和胞吐作用

  課堂組織

  一.提問

  1. 組織學(xué)、胚胎學(xué)、細(xì)胞、組織的概念

  2. 組織胚胎學(xué)的研究方法

  二.結(jié)合Powerpoint幻燈片扼要復(fù)習(xí)上次課內(nèi)容并加以總結(jié)醫(yī)學(xué),教育|網(wǎng) 搜集整理

  三.講新課

  1. 采用Powerpoint幻燈電化教學(xué),實(shí)驗(yàn)課前看電視教學(xué)片

  2. 本章共計(jì)6學(xué)時(shí),講授4學(xué)時(shí),實(shí)驗(yàn)2學(xué)時(shí)

  3. 實(shí)驗(yàn)課在顯微鏡室上,詳見實(shí)驗(yàn)與繪圖指導(dǎo),即另一本教案(實(shí)驗(yàn)課用)

  授課提綱

  一.細(xì)胞的形態(tài)與大小

  二.細(xì)胞的構(gòu)造與功能

 ?。ㄒ唬┘?xì)胞膜的結(jié)構(gòu)

  1. 化學(xué)成分:蛋白質(zhì)、酶、脂類、多糖、水、無機(jī)離子、微量核酸

  2. 分子結(jié)構(gòu):EM下,分出平行三層,內(nèi)外二層電子致密度高,為磷脂分子,中間層為鑲嵌的球蛋白,構(gòu)成單位膜

 ?。?)脂質(zhì)雙分子層

 ?。?)球蛋白

  (3)細(xì)胞膜上的糖類(細(xì)胞衣、糖衣)

 ?。ǘ┘?xì)胞膜的功能

  1. 物質(zhì)運(yùn)輸

  (1)擴(kuò)散作用

 ?。?)主動運(yùn)輸

  (3)胞吞與胞吐

  2. 構(gòu)成受體

  3. 細(xì)胞膜抗原

  4. 保護(hù)作用、運(yùn)動、吸收、分泌、分化

 ?。ㄈ┘?xì)胞質(zhì)的構(gòu)造和功能

  1. 基質(zhì)(溶質(zhì)、內(nèi)含物):是存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物。

  細(xì)胞骨架、支架作用,維持細(xì)胞形狀

  2. 細(xì)胞器

 ?。?)線粒體Mitochondria 雙層單位膜構(gòu)成的顆粒狀或短棒狀結(jié)構(gòu)。

  功能:進(jìn)行生物氧化、提供能量

 ?。?)核糖體(核蛋白體)(Ribsome)由大小2個(gè)亞基構(gòu)成,分游離核糖體、聚核糖體。功能:合成蛋白質(zhì)

 ?。?)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Endoplasmic reticulum

 ?、?粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)RER:單位膜構(gòu)成,有核糖體

  功能:參與蛋白質(zhì)合成與運(yùn)輸

 ?、?滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)SER:單位膜構(gòu)成,無核糖體

  功能:根據(jù)細(xì)胞類型定,參與糖元、脂肪、固醇、激素合成

 ?。?)高爾基復(fù)合體Golgi complex, 由扁平囊泡、大泡、小泡構(gòu)成

  功能:形成分泌顆粒,合成多糖與脂蛋白

 ?。?)溶酶體Lysosome 單位膜包有水解酶

  功能:消除作用,精子頂體也是溶酶體

  (6)過氧化物酶體Peroxisome單位膜包氧化酶,過氧化氫酶

  功能:氧化,產(chǎn)生過氧化氫

 ?。?)中心體Centrosome,2個(gè)中心粒外包致密物質(zhì),參與細(xì)胞分裂

 ?。?)微絲Microfilament 肌動蛋白構(gòu)成,MF中起收縮作用,NC、上皮細(xì)胞起支持作用

  微管Microtubule 微管蛋白構(gòu)成,纖毛、鞭毛、紡錘體中運(yùn)動,NC中支持與運(yùn)輸

  教學(xué)法

  多媒體教學(xué)

  課目 細(xì)胞學(xué)(續(xù)第二次課)Cytology

  目的要求

  1. 掌握細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)和機(jī)能

  2. 掌握細(xì)胞周期

  3. 掌握細(xì)胞的有絲分裂與無絲分裂

  4. 了解細(xì)胞的分化、衰老和死亡

  重點(diǎn)

  細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)、染色質(zhì)、染色體、細(xì)胞周期、細(xì)胞分裂

  難點(diǎn)

  1. 染色質(zhì)(常染色質(zhì)、異染色質(zhì))

  2. 染色體

  3. 細(xì)胞繁殖周期

  課堂組織

  一.提問

  1. 脂質(zhì)球蛋白鑲嵌模型

  2. 細(xì)胞膜的功能

  3. 各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)及功能

  4. 溶酶體的形成與退化過程

  二.結(jié)合Powerpoint幻燈片扼要復(fù)習(xí)細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)的內(nèi)容并加以歸納和總結(jié)

  三.上新課

  1. 采用Powerpoint幻燈片,多媒體教學(xué)

  2. 講授2學(xué)時(shí),實(shí)驗(yàn)2學(xué)時(shí)

  3. 實(shí)驗(yàn)課在顯微鏡室上,具體內(nèi)容等詳見實(shí)驗(yàn)、繪圖指導(dǎo),即另一本教案

  授課提綱

 ?。ㄋ模┘?xì)胞核Nucleus

  1. 核膜:薄層單位膜,外面附著蛋白質(zhì),內(nèi)面光滑,膜上有核孔,便于物質(zhì)交換。

  2. 核質(zhì)nucleoplasm :無定型的膠狀物,含各種酶與無機(jī)鹽。

  3. 核仁nucleolus:由核糖核酸和核蛋白構(gòu)成,網(wǎng)狀支架,可合成核蛋白。

  4. 染色質(zhì)Chromatin:由蛋白質(zhì)核DNA組成,DNA是遺傳物質(zhì)。

  常染色質(zhì):是指間期核的染色質(zhì)上和分裂期的染色體上被堿性染料著色較淺的區(qū)域。

  異染色質(zhì):是間期核的染色質(zhì)上和分裂期的染色體上被堿性染料著色較深的區(qū)域,屬非活動性染色質(zhì)。

  染色體Chromosome細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期,染色質(zhì)高度卷曲和螺旋化,變粗變短,形成一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)量的染色體。

  不同動物染色體的數(shù)目不同。哺乳動物有一對性染色體:♀-XX,♂-XY

  應(yīng)用與于生產(chǎn)中,精子分離X-Y精子,X精子與卵結(jié)合產(chǎn)♀,奶牛產(chǎn)奶;Y精子與卵結(jié)合產(chǎn)♂,鹿茸,麝香等。

  三.細(xì)胞周期Cell cycle

  指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束時(shí)開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的一個(gè)完整的細(xì)胞世代。

  (一)分裂間期

  1. G1期,DNA合成前期

  2. S期,DNA合成期

  3. G2期,DNA合成后期

 ?。ǘ┓至哑冢∕期)

  形成2個(gè)子細(xì)胞,細(xì)胞周期結(jié)束

  四.細(xì)胞分裂Cell division

 ?。ㄒ唬┯薪z分裂Mitosis 又分四期:

  1. 前期Prophase

  2. 中期Metaphase

  3. 后期Anaphase

  4. 末期Telophase

  (二)無絲分裂Amitosis(直接分裂)

  五.細(xì)胞分化cell differentiation

  是在發(fā)育進(jìn)程中,細(xì)胞發(fā)生化學(xué)組成、形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能彼此互異逐步改變的現(xiàn)象。高等生物細(xì)胞分化很顯著,基本不可逆轉(zhuǎn),受遺傳物質(zhì)的調(diào)控和環(huán)境影響。

  六.細(xì)胞的衰老與死亡

  教學(xué)法

  多媒體教學(xué)

  [ 教案 ]

  [ 實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) ]

  實(shí)驗(yàn)32 顯微鏡的構(gòu)造和使用方法,組織切片的制做程序

  一、目的要求

  ⑴掌握顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)及使用方法。

  (2)了解組織切片制做知識,有助于觀察切片。

  二、觀察內(nèi)容

  1.顯微鏡的一般構(gòu)造:分光學(xué)部分和機(jī)械部分:

 ?、殴鈱W(xué)部分

  目鏡?鶴霸誥低采隙?,冷熸讐涡謩傠,常用的?10×目鏡。

  物鏡:裝在轉(zhuǎn)換器上,一般常用的物鏡為4×、10×、40×和100×(油浸鏡頭)。

  集光器:包括聚光鏡和光圈(虹彩)兩部分。裝于載物臺下面。

  ⑵機(jī)械部分

  鏡座:為顯微鏡基部,用以固定鏡身。

  載物臺:為放置標(biāo)本的平臺,其中有通光孔,兩旁有壓片和標(biāo)本移動器。

  鏡頭轉(zhuǎn)換器:位于鏡筒之下,可裝物鏡,為轉(zhuǎn)換不同倍數(shù)的物鏡用。

  粗調(diào)節(jié)輪:旋轉(zhuǎn)時(shí),載物臺升降距離較大。

  微調(diào)節(jié)輪:旋轉(zhuǎn)一周,可使鏡頭升或降0.1毫米。

  鏡臂:供握持顯微鏡用。

  粗調(diào)限位器:撥下限位器使載物臺只能使粗調(diào)上升至所限位置,可避免因操作不慎而導(dǎo)致高倍鏡與標(biāo)本相碰。

  2.顯微鏡的使用方法

  ⑴低倍鏡使用法:

 ?、賹⑶衅瑯?biāo)本置于載物臺上,使切片內(nèi)的標(biāo)本,對準(zhǔn)鏡臺中央小孔,然后用壓片夾固定切片。

  ②將10×物鏡移至中央(位于光軸上),旋動粗調(diào)節(jié)輪使物鏡與載片相距1厘米左右。

 ?、蹖⒎垂忡R(自帶光源的顯微鏡除外)對準(zhǔn)光源,集光器調(diào)到適當(dāng)亮度。

 ?、芤宰笱刍蛴已蹖?zhǔn)目鏡,進(jìn)行觀察。旋動粗調(diào)節(jié)輪,使載物臺漸漸上升,至標(biāo)本的影象現(xiàn)出為止,撥動粗調(diào)限位器限位。

 ?、菪齽蛹?xì)調(diào)節(jié)輪,使載物臺上、下微微移動,直到顯出清晰的影象。

  ⑵高倍鏡使用方法:

 ?、僖狼胺ㄏ扔玫捅剁R將焦點(diǎn)調(diào)準(zhǔn),使物象清晰。

 ?、趯⒂麢z標(biāo)本的某一部分移至低倍鏡視野中央。

 ?、壑苯诱{(diào)轉(zhuǎn)高倍物鏡,稍將細(xì)調(diào)節(jié)輪上下旋動,至顯出清晰的物象為止。

 ?、怯顽R的使用方法:

 ?、儆糜顽R前,先將集光器上升到頂,虹彩放大,使亮度達(dá)到最強(qiáng)度。

  ②將需要詳細(xì)觀察的部分,移到視野中心,用壓片夾固定,切勿移動。

  ③將高倍物鏡移開,滴加一滴香柏油于切片被檢部位。

 ?、苻D(zhuǎn)換油鏡頭,使鏡頭與被檢物間充滿香柏油,然后轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)輪,直至有清晰的物象為止,此時(shí)切勿使用粗調(diào)節(jié)輪,以免壓碎切片,損壞鏡頭。

 ?、萦猛暧顽R后,必須將鏡頭和切片上的香柏油用擦鏡紙擦去,并用沾有乙醚——酒精液(7:3)的擦鏡紙擦拭鏡頭及載片,以免污損鏡頭。

  3.使用顯微鏡注意事項(xiàng)

 ?、僖苿语@微鏡時(shí)一手緊握鏡臂,一手平托鏡座,使鏡身保持直立狀態(tài)。

  ②凡光學(xué)部分不可用手指或其它物品(如毛巾、紙張)擦拭,要用清潔的擦鏡紙,必要時(shí)加一滴乙醚——酒精液擦拭。

 ?、鄄坏秒S意拆卸顯微鏡的任何組成部分。

 ?、懿荒苡酶弑剁R檢視任何不加蓋片的標(biāo)本,以免污染物鏡,顯微鏡任何部分不應(yīng)受潮。

 ?、莸魮Q高倍物鏡或油浸鏡后,即不能用粗調(diào)節(jié)輪,只能用細(xì)調(diào)節(jié)輪,以免損壞載片及鏡頭。

 ?、奘褂弥邪l(fā)生問題時(shí),請隨時(shí)報(bào)告教師,切勿自行處理。

  組織切片制作原理和程序:

  1.取材:要取最新鮮的正常的材料。由于各器官組織壞死變化很快,所以取材要求迅速。取材時(shí)要用鋒利的刀片或剪刀,勿用鑷子對組織加以壓迫,以免組織破裂和變形。

  2.固定:將取下的材料放在固定液中固定24小時(shí),目的是防止腐敗、保持原有結(jié)構(gòu)并使組織硬化,便于處理,常用的固定液有10%福爾馬林,Bouin液及Zenker液。

  3.脫水及透明:材料固定后,要經(jīng)過脫水和透明處理,才能包埋。脫水是除去組織中的水分,透明是一種能使石蠟、火棉膠溶解的溶劑,使組織透明,并使石蠟或火棉膠逐漸導(dǎo)入組織內(nèi)。

  4.包埋:材料脫水透明后,即可包埋,包埋可使材料有適當(dāng)?shù)挠捕缺阌谇谐杀∑?,包埋常用石蠟和火棉膠,其中石蠟最常用,需時(shí)短,且可制成較薄的切片。

  火棉膠則用于神經(jīng)組織、眼球等大塊或宜于收縮的材料。

  5.切片及貼片:切片法有徒手切片、冰凍切片、石蠟切片和火棉膠切片。

  石臘切片用于輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)或滑走切片機(jī)操作?;鹈弈z用于滑走切片機(jī)操作。

  石蠟切片用蛋白甘油混合液貼附于玻片上,火棉膠切片,則可直接染色,染色后,封藏于玻片上。

  6.染色:染色的目的式使細(xì)胞中的構(gòu)造清楚,易于觀察。染料的種類繁多,其性質(zhì)也不同,有酸性、中性、堿性。染色方法有單一法、雙重法、三重法。其中雙重法以蘇木素——伊紅染色法最常用。

  7.封藏:染色后的切片,用中性樹膠或合成樹膠加蓋玻片封藏。

  實(shí)驗(yàn)33 細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)

  一、目的要求:通過觀察要求掌握細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。

  二、準(zhǔn)備工作:復(fù)習(xí)講課內(nèi)容和預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。

  三、觀察內(nèi)容

  1.卵細(xì)胞:1號切片

  卵細(xì)胞是動物體內(nèi)的大型細(xì)胞,觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)較為方便。

  貓、豬或羊的卵巢切片,Bouin氏液固定,石蠟包埋,HE染色。

  先用低倍鏡觀察,在靠近卵巢周邊處,可見到成群存在(貓)或散在分布(豬、羊)的大型圓形卵細(xì)胞,在卵細(xì)胞周圍還有一層扁平的細(xì)胞圍繞,共同組成初級卵泡,此時(shí)的卵細(xì)胞系初級卵母細(xì)胞,外周的扁平細(xì)胞叫卵泡細(xì)胞。

  選擇一個(gè)結(jié)構(gòu)清楚的初級卵泡移到視野中央,轉(zhuǎn)換成高倍鏡觀察,重點(diǎn)觀察卵細(xì)胞。

  細(xì)胞膜 位于細(xì)胞的表面,在固定染色的切片上為一薄膜。

  細(xì)胞質(zhì) 在本切片中,只能看到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有紅染的小顆粒(卵黃顆粒),其它的細(xì)胞器和內(nèi)含物在制片過程中或被溶劑溶解或未染出。

  細(xì)胞核 呈圓形,位于細(xì)胞的中央或稍偏的位置,染成藍(lán)紫色,核膜明顯,染色質(zhì)呈深染的團(tuán)塊或顆粒狀,有1-2個(gè)核仁。

  高倍鏡下繪圖:示卵細(xì)胞構(gòu)造。

  注解:細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、卵黃顆粒、細(xì)胞核、核膜與核仁。

  2.神經(jīng)細(xì)胞:40號切片,4號切片

  低倍鏡下,可見到一些大型帶突起的藍(lán)染細(xì)胞——脊髓腹角運(yùn)動神經(jīng)細(xì)胞。這種神經(jīng)細(xì)胞有很多突起,但由于切片關(guān)系,只能看到其中的數(shù)個(gè)突起。胞質(zhì)內(nèi)有染色呈深藍(lán)紫色的塊狀或顆粒狀物質(zhì),稱尼氏體,在電鏡下為粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。胞核著色較淡,多位于細(xì)胞中央,內(nèi)含少量染色質(zhì),核膜明顯,有一個(gè)大而圓的核仁。

  高倍鏡下繪圖:示神經(jīng)細(xì)胞的構(gòu)造。

  注解:胞體、胞突、胞核、尼氏體、核仁。

  3.肝細(xì)胞:68號切片

  豬肝,Bouin氏液固定,石蠟切片,HE染色.

  低倍鏡下找到呈多邊形的肝小葉,選擇一個(gè)肝小葉換高倍鏡觀察,可見到呈索狀排列的肝細(xì)胞,呈多邊形,有1-2個(gè)圓形細(xì)胞核,核仁明顯,核膜清楚,核內(nèi)染色質(zhì)稀疏,染色較淺

  觀察細(xì)胞器與內(nèi)含物

  細(xì)胞器與內(nèi)含物的種類很多,實(shí)驗(yàn)課僅觀察幾種主要的細(xì)胞器和內(nèi)含物在光鏡下的形態(tài)和位置。各種細(xì)胞器和內(nèi)含物,在一般的HE染色的切片上看不到,須用特殊方法染色顯示。

  線粒體——示教:3號片

  小狗胰臟,Regaud氏液固定,石蠟切片,鐵蘇木素染色。

  線粒體用鐵蘇木素染色呈黑色,分布于核周圍的細(xì)胞質(zhì)中,線粒體在高倍鏡下呈粒狀、線狀或短棒狀,或直或曲,輪廓鮮明。

  胰臟的分泌細(xì)胞呈錐形,核大而圓,位于細(xì)胞中央,細(xì)胞游離端聚集有許多大而圓的黑色顆粒為分泌顆粒。

  高爾基復(fù)合體——示教:2號片

  狗或豬的脊神經(jīng)節(jié),Golgi氏亞砷酸硝酸銀法鍍?nèi)尽?

  在切片上有大小不一的圓形脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,胞核不著色,但能看到淡黃色的核仁。核周圍的細(xì)胞質(zhì)中有鍍?nèi)境珊谏木W(wǎng)狀或顆粒狀物,即光鏡下的高爾基復(fù)合體。

  糖元——示教:6號片

  豬肝,冷Carnoy氏液固定,PAS反應(yīng)法顯示糖元,蘇木素復(fù)染胞核。

  在高倍鏡下,肝細(xì)胞中可見到大量紫紅色的糖元顆粒或小塊,在很多肝細(xì)胞中,糖元偏于細(xì)胞一側(cè),此系制片過程造成,生活狀態(tài)時(shí)分布較均勻。

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