[ 執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試教學(xué)大綱 ]

　　一、細(xì)胞的形態(tài)與大小

　　 (一)細(xì)胞的形態(tài) (二)細(xì)胞的大小

　　二、細(xì)胞的構(gòu)造與功能

　　(一)細(xì)胞膜 (二)細(xì)胞質(zhì) (三)細(xì)胞核

　　三、細(xì)胞周期

　?。ㄒ唬〨1期 （二）S期 （三）G2期 （四）M期

　　四、細(xì)胞分裂

　　（一）無絲分裂 （二）有絲分裂

　　五、細(xì)胞分化

　　六、細(xì)胞衰老與死亡

　　[ 文本教案 ]

　　目的要求

　　1． 要求學(xué)生掌握細(xì)胞的形態(tài)和大小

　　2． 掌握細(xì)胞膜的“液態(tài)鑲嵌模型”的結(jié)構(gòu)及功能

　　3． 掌握細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能

　　重 點(diǎn)

　　液態(tài)鑲嵌模型，各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能

　　難 點(diǎn)

　　1． 細(xì)胞膜的分子結(jié)構(gòu)，即液態(tài)鑲嵌模型或脂質(zhì)球蛋白鑲嵌模型

　　2． 細(xì)胞膜的功能中的擴(kuò)散作用、主動(dòng)運(yùn)輸、胞吞作用和胞吐作用

　　課堂組織

　　一．提問

　　1． 組織學(xué)、胚胎學(xué)、細(xì)胞、組織的概念

　　2． 組織胚胎學(xué)的研究方法

　　二．結(jié)合Powerpoint幻燈片扼要復(fù)習(xí)上次課內(nèi)容并加以總結(jié)醫(yī)學(xué)，教育|網(wǎng) 搜集整理

　　三．講新課

　　1． 采用Powerpoint幻燈電化教學(xué)，實(shí)驗(yàn)課前看電視教學(xué)片

　　2． 本章共計(jì)6學(xué)時(shí)，講授4學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)2學(xué)時(shí)

　　3． 實(shí)驗(yàn)課在顯微鏡室上，詳見實(shí)驗(yàn)與繪圖指導(dǎo)，即另一本教案（實(shí)驗(yàn)課用）

　　授課提綱

　　一．細(xì)胞的形態(tài)與大小

　　二．細(xì)胞的構(gòu)造與功能

　?。ㄒ唬┘?xì)胞膜的結(jié)構(gòu)

　　1． 化學(xué)成分：蛋白質(zhì)、酶、脂類、多糖、水、無機(jī)離子、微量核酸

　　2． 分子結(jié)構(gòu)：EM下，分出平行三層，內(nèi)外二層電子致密度高，為磷脂分子，中間層為鑲嵌的球蛋白，構(gòu)成單位膜

　　（1）脂質(zhì)雙分子層

　?。?）球蛋白

　　（3）細(xì)胞膜上的糖類（細(xì)胞衣、糖衣）

　?。ǘ┘?xì)胞膜的功能

　　1． 物質(zhì)運(yùn)輸

　?。?）擴(kuò)散作用

　　（2）主動(dòng)運(yùn)輸

　?。?）胞吞與胞吐

　　2． 構(gòu)成受體

　　3． 細(xì)胞膜抗原

　　4． 保護(hù)作用、運(yùn)動(dòng)、吸收、分泌、分化

　?。ㄈ┘?xì)胞質(zhì)的構(gòu)造和功能

　　1． 基質(zhì)（溶質(zhì)、內(nèi)含物）：是存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物。

　　細(xì)胞骨架、支架作用，維持細(xì)胞形狀

　　2． 細(xì)胞器

　?。?）線粒體Mitochondria 雙層單位膜構(gòu)成的顆粒狀或短棒狀結(jié)構(gòu)。

　　功能：進(jìn)行生物氧化、提供能量

　　（2）核糖體（核蛋白體）（Ribsome）由大小2個(gè)亞基構(gòu)成，分游離核糖體、聚核糖體。功能：合成蛋白質(zhì)

　　（3）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Endoplasmic reticulum

　?、?粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)RER：?jiǎn)挝荒?gòu)成，有核糖體

　　功能：參與蛋白質(zhì)合成與運(yùn)輸

　?、?滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)SER：?jiǎn)挝荒?gòu)成，無核糖體

　　功能：根據(jù)細(xì)胞類型定，參與糖元、脂肪、固醇、激素合成

　　（4）高爾基復(fù)合體Golgi complex， 由扁平囊泡、大泡、小泡構(gòu)成

　　功能：形成分泌顆粒，合成多糖與脂蛋白

　?。?）溶酶體Lysosome 單位膜包有水解酶

　　功能：消除作用，精子頂體也是溶酶體

　?。?）過氧化物酶體Peroxisome單位膜包氧化酶，過氧化氫酶

　　功能：氧化，產(chǎn)生過氧化氫

　?。?）中心體Centrosome,2個(gè)中心粒外包致密物質(zhì)，參與細(xì)胞分裂

　　（8）微絲Microfilament 肌動(dòng)蛋白構(gòu)成，MF中起收縮作用，NC、上皮細(xì)胞起支持作用

　　微管Microtubule 微管蛋白構(gòu)成，纖毛、鞭毛、紡錘體中運(yùn)動(dòng)，NC中支持與運(yùn)輸

　　教學(xué)法

　　多媒體教學(xué)

　　課目 細(xì)胞學(xué)（續(xù)第二次課）Cytology

　　目的要求

　　1． 掌握細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)和機(jī)能

　　2． 掌握細(xì)胞周期

　　3． 掌握細(xì)胞的有絲分裂與無絲分裂

　　4． 了解細(xì)胞的分化、衰老和死亡

　　重點(diǎn)

　　細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)、染色質(zhì)、染色體、細(xì)胞周期、細(xì)胞分裂

　　難點(diǎn)

　　1． 染色質(zhì)（常染色質(zhì)、異染色質(zhì)）

　　2． 染色體

　　3． 細(xì)胞繁殖周期

　　課堂組織

　　一．提問

　　1． 脂質(zhì)球蛋白鑲嵌模型

　　2． 細(xì)胞膜的功能

　　3． 各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)及功能

　　4． 溶酶體的形成與退化過程

　　二．結(jié)合Powerpoint幻燈片扼要復(fù)習(xí)細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)的內(nèi)容并加以歸納和總結(jié)

　　三．上新課

　　1． 采用Powerpoint幻燈片，多媒體教學(xué)

　　2． 講授2學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)2學(xué)時(shí)

　　3． 實(shí)驗(yàn)課在顯微鏡室上，具體內(nèi)容等詳見實(shí)驗(yàn)、繪圖指導(dǎo)，即另一本教案

　　授課提綱

　?。ㄋ模┘?xì)胞核Nucleus

　　1． 核膜：薄層單位膜，外面附著蛋白質(zhì)，內(nèi)面光滑，膜上有核孔，便于物質(zhì)交換。

　　2． 核質(zhì)nucleoplasm ：無定型的膠狀物，含各種酶與無機(jī)鹽。

　　3． 核仁nucleolus：由核糖核酸和核蛋白構(gòu)成，網(wǎng)狀支架，可合成核蛋白。

　　4． 染色質(zhì)Chromatin：由蛋白質(zhì)核DNA組成，DNA是遺傳物質(zhì)。

　　常染色質(zhì)：是指間期核的染色質(zhì)上和分裂期的染色體上被堿性染料著色較淺的區(qū)域。

　　異染色質(zhì)：是間期核的染色質(zhì)上和分裂期的染色體上被堿性染料著色較深的區(qū)域，屬非活動(dòng)性染色質(zhì)。

　　染色體Chromosome細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期，染色質(zhì)高度卷曲和螺旋化，變粗變短，形成一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)量的染色體。

　　不同動(dòng)物染色體的數(shù)目不同。哺乳動(dòng)物有一對(duì)性染色體：♀-XX，♂-XY

　　應(yīng)用與于生產(chǎn)中，精子分離X-Y精子，X精子與卵結(jié)合產(chǎn)♀，奶牛產(chǎn)奶；Y精子與卵結(jié)合產(chǎn)♂，鹿茸，麝香等。

　　三．細(xì)胞周期Cell cycle

　　指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束時(shí)開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的一個(gè)完整的細(xì)胞世代。

　?。ㄒ唬┓至验g期

　　1． G1期，DNA合成前期

　　2． S期，DNA合成期

　　3． G2期，DNA合成后期

　?。ǘ┓至哑冢∕期）

　　形成2個(gè)子細(xì)胞，細(xì)胞周期結(jié)束

　　四．細(xì)胞分裂Cell division

　　（一）有絲分裂Mitosis 又分四期：

　　1． 前期Prophase

　　2． 中期Metaphase

　　3． 后期Anaphase

　　4． 末期Telophase

　?。ǘo絲分裂Amitosis（直接分裂）

　　五．細(xì)胞分化cell differentiation

　　是在發(fā)育進(jìn)程中，細(xì)胞發(fā)生化學(xué)組成、形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能彼此互異逐步改變的現(xiàn)象。高等生物細(xì)胞分化很顯著，基本不可逆轉(zhuǎn)，受遺傳物質(zhì)的調(diào)控和環(huán)境影響。

　　六．細(xì)胞的衰老與死亡

　　教學(xué)法

　　多媒體教學(xué)

　　[ 教案 ]

　　[ 實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) ]

　　實(shí)驗(yàn)32 顯微鏡的構(gòu)造和使用方法，組織切片的制做程序

　　一、目的要求

　?、耪莆诊@微鏡的基本結(jié)構(gòu)及使用方法。

　　(2)了解組織切片制做知識(shí)，有助于觀察切片。

　　二、觀察內(nèi)容

　　1．顯微鏡的一般構(gòu)造：分光學(xué)部分和機(jī)械部分：

　?、殴鈱W(xué)部分

　　目鏡?鶴霸誥低采隙?，冷熸讐涡謩傠，常用的?10×目鏡。

　　物鏡：裝在轉(zhuǎn)換器上，一般常用的物鏡為4×、10×、40×和100×（油浸鏡頭）。

　　集光器：包括聚光鏡和光圈（虹彩）兩部分。裝于載物臺(tái)下面。

　?、茩C(jī)械部分

　　鏡座：為顯微鏡基部，用以固定鏡身。

　　載物臺(tái)：為放置標(biāo)本的平臺(tái)，其中有通光孔，兩旁有壓片和標(biāo)本移動(dòng)器。

　　鏡頭轉(zhuǎn)換器：位于鏡筒之下，可裝物鏡，為轉(zhuǎn)換不同倍數(shù)的物鏡用。

　　粗調(diào)節(jié)輪：旋轉(zhuǎn)時(shí)，載物臺(tái)升降距離較大。

　　微調(diào)節(jié)輪：旋轉(zhuǎn)一周，可使鏡頭升或降0.1毫米。

　　鏡臂：供握持顯微鏡用。

　　粗調(diào)限位器：撥下限位器使載物臺(tái)只能使粗調(diào)上升至所限位置，可避免因操作不慎而導(dǎo)致高倍鏡與標(biāo)本相碰。

　　2．顯微鏡的使用方法

　?、诺捅剁R使用法：

　?、賹⑶衅瑯?biāo)本置于載物臺(tái)上，使切片內(nèi)的標(biāo)本，對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)中央小孔，然后用壓片夾固定切片。

　　②將10×物鏡移至中央（位于光軸上），旋動(dòng)粗調(diào)節(jié)輪使物鏡與載片相距1厘米左右。

　?、蹖⒎垂忡R（自帶光源的顯微鏡除外）對(duì)準(zhǔn)光源，集光器調(diào)到適當(dāng)亮度。

　?、芤宰笱刍蛴已蹖?duì)準(zhǔn)目鏡，進(jìn)行觀察。旋動(dòng)粗調(diào)節(jié)輪，使載物臺(tái)漸漸上升，至標(biāo)本的影象現(xiàn)出為止，撥動(dòng)粗調(diào)限位器限位。

　　⑤旋動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)輪，使載物臺(tái)上、下微微移動(dòng)，直到顯出清晰的影象。

　?、聘弑剁R使用方法：

　　①依前法先用低倍鏡將焦點(diǎn)調(diào)準(zhǔn)，使物象清晰。

　?、趯⒂麢z標(biāo)本的某一部分移至低倍鏡視野中央。

　?、壑苯诱{(diào)轉(zhuǎn)高倍物鏡，稍將細(xì)調(diào)節(jié)輪上下旋動(dòng)，至顯出清晰的物象為止。

　?、怯顽R的使用方法：

　?、儆糜顽R前，先將集光器上升到頂，虹彩放大，使亮度達(dá)到最強(qiáng)度。

　?、趯⑿枰敿?xì)觀察的部分，移到視野中心，用壓片夾固定，切勿移動(dòng)。

　?、蹖⒏弑段镧R移開，滴加一滴香柏油于切片被檢部位。

　?、苻D(zhuǎn)換油鏡頭，使鏡頭與被檢物間充滿香柏油，然后轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)輪，直至有清晰的物象為止，此時(shí)切勿使用粗調(diào)節(jié)輪，以免壓碎切片，損壞鏡頭。

　?、萦猛暧顽R后，必須將鏡頭和切片上的香柏油用擦鏡紙擦去，并用沾有乙醚——酒精液（7：3）的擦鏡紙擦拭鏡頭及載片，以免污損鏡頭。

　　3．使用顯微鏡注意事項(xiàng)

　　①移動(dòng)顯微鏡時(shí)一手緊握鏡臂，一手平托鏡座，使鏡身保持直立狀態(tài)。

　　②凡光學(xué)部分不可用手指或其它物品（如毛巾、紙張）擦拭，要用清潔的擦鏡紙，必要時(shí)加一滴乙醚——酒精液擦拭。

　　③不得隨意拆卸顯微鏡的任何組成部分。

　?、懿荒苡酶弑剁R檢視任何不加蓋片的標(biāo)本，以免污染物鏡，顯微鏡任何部分不應(yīng)受潮。

　?、莸魮Q高倍物鏡或油浸鏡后，即不能用粗調(diào)節(jié)輪，只能用細(xì)調(diào)節(jié)輪，以免損壞載片及鏡頭。

　?、奘褂弥邪l(fā)生問題時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)報(bào)告教師，切勿自行處理。

　　組織切片制作原理和程序：

　　1．取材：要取最新鮮的正常的材料。由于各器官組織壞死變化很快，所以取材要求迅速。取材時(shí)要用鋒利的刀片或剪刀，勿用鑷子對(duì)組織加以壓迫，以免組織破裂和變形。

　　2．固定：將取下的材料放在固定液中固定24小時(shí)，目的是防止腐敗、保持原有結(jié)構(gòu)并使組織硬化，便于處理，常用的固定液有10％福爾馬林，Bouin液及Zenker液。

　　3．脫水及透明：材料固定后，要經(jīng)過脫水和透明處理，才能包埋。脫水是除去組織中的水分，透明是一種能使石蠟、火棉膠溶解的溶劑，使組織透明，并使石蠟或火棉膠逐漸導(dǎo)入組織內(nèi)。

　　4．包埋：材料脫水透明后，即可包埋，包埋可使材料有適當(dāng)?shù)挠捕缺阌谇谐杀∑?，包埋常用石蠟和火棉膠，其中石蠟最常用，需時(shí)短，且可制成較薄的切片。

　　火棉膠則用于神經(jīng)組織、眼球等大塊或宜于收縮的材料。

　　5．切片及貼片：切片法有徒手切片、冰凍切片、石蠟切片和火棉膠切片。

　　石臘切片用于輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)或滑走切片機(jī)操作?；鹈弈z用于滑走切片機(jī)操作。

　　石蠟切片用蛋白甘油混合液貼附于玻片上，火棉膠切片，則可直接染色，染色后，封藏于玻片上。

　　6．染色：染色的目的式使細(xì)胞中的構(gòu)造清楚，易于觀察。染料的種類繁多，其性質(zhì)也不同，有酸性、中性、堿性。染色方法有單一法、雙重法、三重法。其中雙重法以蘇木素——伊紅染色法最常用。

　　7．封藏：染色后的切片，用中性樹膠或合成樹膠加蓋玻片封藏。

　　實(shí)驗(yàn)33 細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)

　　一、目的要求：通過觀察要求掌握細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。

　　二、準(zhǔn)備工作：復(fù)習(xí)講課內(nèi)容和預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。

　　三、觀察內(nèi)容

　　1．卵細(xì)胞：1號(hào)切片

　　卵細(xì)胞是動(dòng)物體內(nèi)的大型細(xì)胞，觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)較為方便。

　　貓、豬或羊的卵巢切片，Bouin氏液固定，石蠟包埋，HE染色。

　　先用低倍鏡觀察，在靠近卵巢周邊處，可見到成群存在（貓）或散在分布（豬、羊）的大型圓形卵細(xì)胞，在卵細(xì)胞周圍還有一層扁平的細(xì)胞圍繞，共同組成初級(jí)卵泡，此時(shí)的卵細(xì)胞系初級(jí)卵母細(xì)胞，外周的扁平細(xì)胞叫卵泡細(xì)胞。

　　選擇一個(gè)結(jié)構(gòu)清楚的初級(jí)卵泡移到視野中央，轉(zhuǎn)換成高倍鏡觀察，重點(diǎn)觀察卵細(xì)胞。

　　細(xì)胞膜 位于細(xì)胞的表面，在固定染色的切片上為一薄膜。

　　細(xì)胞質(zhì) 在本切片中，只能看到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有紅染的小顆粒（卵黃顆粒），其它的細(xì)胞器和內(nèi)含物在制片過程中或被溶劑溶解或未染出。

　　細(xì)胞核 呈圓形，位于細(xì)胞的中央或稍偏的位置，染成藍(lán)紫色，核膜明顯，染色質(zhì)呈深染的團(tuán)塊或顆粒狀，有1-2個(gè)核仁。

　　高倍鏡下繪圖：示卵細(xì)胞構(gòu)造。

　　注解：細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、卵黃顆粒、細(xì)胞核、核膜與核仁。

　　2．神經(jīng)細(xì)胞：40號(hào)切片，4號(hào)切片

　　低倍鏡下，可見到一些大型帶突起的藍(lán)染細(xì)胞——脊髓腹角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞。這種神經(jīng)細(xì)胞有很多突起，但由于切片關(guān)系，只能看到其中的數(shù)個(gè)突起。胞質(zhì)內(nèi)有染色呈深藍(lán)紫色的塊狀或顆粒狀物質(zhì)，稱尼氏體，在電鏡下為粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。胞核著色較淡，多位于細(xì)胞中央，內(nèi)含少量染色質(zhì)，核膜明顯，有一個(gè)大而圓的核仁。

　　高倍鏡下繪圖：示神經(jīng)細(xì)胞的構(gòu)造。

　　注解：胞體、胞突、胞核、尼氏體、核仁。

　　3．肝細(xì)胞：68號(hào)切片

　　豬肝，Bouin氏液固定，石蠟切片，HE染色.

　　低倍鏡下找到呈多邊形的肝小葉，選擇一個(gè)肝小葉換高倍鏡觀察，可見到呈索狀排列的肝細(xì)胞，呈多邊形，有1-2個(gè)圓形細(xì)胞核，核仁明顯，核膜清楚，核內(nèi)染色質(zhì)稀疏，染色較淺

　　觀察細(xì)胞器與內(nèi)含物

　　細(xì)胞器與內(nèi)含物的種類很多，實(shí)驗(yàn)課僅觀察幾種主要的細(xì)胞器和內(nèi)含物在光鏡下的形態(tài)和位置。各種細(xì)胞器和內(nèi)含物，在一般的HE染色的切片上看不到，須用特殊方法染色顯示。

　　線粒體——示教：3號(hào)片

　　小狗胰臟，Regaud氏液固定，石蠟切片，鐵蘇木素染色。

　　線粒體用鐵蘇木素染色呈黑色，分布于核周圍的細(xì)胞質(zhì)中，線粒體在高倍鏡下呈粒狀、線狀或短棒狀，或直或曲，輪廓鮮明。

　　胰臟的分泌細(xì)胞呈錐形，核大而圓，位于細(xì)胞中央，細(xì)胞游離端聚集有許多大而圓的黑色顆粒為分泌顆粒。

　　高爾基復(fù)合體——示教：2號(hào)片

　　狗或豬的脊神經(jīng)節(jié)，Golgi氏亞砷酸硝酸銀法鍍?nèi)尽?

　　在切片上有大小不一的圓形脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，胞核不著色，但能看到淡黃色的核仁。核周圍的細(xì)胞質(zhì)中有鍍?nèi)境珊谏木W(wǎng)狀或顆粒狀物，即光鏡下的高爾基復(fù)合體。

　　糖元——示教：6號(hào)片

　　豬肝，冷Carnoy氏液固定，PAS反應(yīng)法顯示糖元，蘇木素復(fù)染胞核。

　　在高倍鏡下，肝細(xì)胞中可見到大量紫紅色的糖元顆?；蛐K，在很多肝細(xì)胞中，糖元偏于細(xì)胞一側(cè)，此系制片過程造成，生活狀態(tài)時(shí)分布較均勻。