1.【問題】淋巴細胞和中性粒細胞基本相等的兩個時間點是?
【解答】新生兒中性粒細胞占絕對優(yōu)勢(6~28)×109/L,1周內降至5×109/L,第6~9d減至與淋巴細胞大致相等,隨后淋巴細胞逐漸增多,嬰兒期以淋巴細胞數(shù)為主(可達70%),2~3歲后,淋巴細胞逐漸減低,中性粒細胞逐漸增高,4~5歲兩者基本相等,形成中性粒細胞和淋巴細胞2次交叉變化曲線,到青春期時與成人相同。
2.【問題】IRMA和RIA的區(qū)別有哪些?
【解答】IRMA與RIA同屬放射性核素標記免疫測定技術,在方法學上各具典型性。因此從某種意義上,二者的比較代表了標記免疫分析中競爭和非競爭結合方法學特點的比較。
①標記物:RIA是以放射性核素標記抗原,抗原有不同種類,標記時需根據其理化和生物學特性,選用不同的放射性核素和方法;IRMA則是標記抗體,為大分子蛋白,性質較穩(wěn)定,不同抗體標記方法基本相同,標記抗體的比活度高,提高了測定的靈敏度。
②反應速率:反應速率與反應物濃度成正比,IRMA反應中,標記抗體為過量,且抗原抗體結合為非競爭性,故反應速率比RIA快。
③反應原理:RIA為競爭抑制性結合,反應參數(shù)與待檢抗原量成反比,IRMA為非競爭性結合,反應參數(shù)與待檢抗原濃度呈正相關。
④特異性:IRMA采用針對不同抗原決定簇的雙抗體結合抗原,反應不易受交叉反應物的干擾,測定特異性較高。
⑤靈敏度和檢測范圍:IRMA反應中,抗原與抗體屬非競爭性,微量抗原能與抗體充分結合;RIA中標記抗原和待檢抗原競爭,與有限量抗體的結合不充分,故IRMA測定的靈敏度明顯高于RIA。此外,由于抗體量大,能結合較多的抗原量,IRMA用于抗原含量較高標本測定時,結果也較RIA好,IRMA標準曲線工作范圍較RIA寬1~2個數(shù)量級。
⑥其他:RIA所用抗體為多克隆性,因此對其親和力及特異性要求較高,但用量很少;IRMA為試劑過量的非競爭性結合反應,對抗體親和力的要求不及RIA,但用量大。此外,RIA可以測定大分子和小分子抗原,但IRMA則只能測定至少有兩個抗原決定簇的抗原。
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